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安徽大學楊雪峰、華南理工大學邊黎明 Adv. Mater.:基于凝聚作用構筑具有自進化大孔結構的超分子水凝膠用于3D多細胞球培養
2023-03-23  來源:高分子科技

  在水凝膠中引入大孔隙以形成大孔水凝膠(MPH),能夠支持所負載細胞的球形生長增強活力和生物功能。但是現有MPH主要通過模板法、冷凍法和氣體發泡法等途徑形成,這會帶來兩個問題:一、孔隙形成過程不具有細胞相容性;二、水凝膠的可注射性和孔隙連通性較差,因此無法滿足3D細胞球培養等生物醫學用途的需求。凝聚作用是指均質生物大分子(如蛋白質和核酸溶液通過-液相分離形成富含大分子濃縮稱為凝聚層)不含大分子的稀釋相的過程,它在精確構筑傳統方法難以制備的微結構生物材料上極具前景。


  近日,安徽大學青年教師楊雪峰博士和華南理工大學邊黎明教授團隊在利用超分子體系的凝聚作用構建MPH方面取得了新進展。在該工作中,作者首先設計了三種組裝砌塊:()蒽二聚體封端八臂聚乙二醇(PEG8-dimer),()醛基修飾γ-環糊精(γCD-CHO)和()聚乙烯醇接枝碳酰肼(PVA-CDH)。隨后,三種組裝砌塊的濃溶液可以通過γCD/蒽二聚體主客體作用和腙鍵串聯連接作用,形具有液體行為的超分子組裝物(SA)。當SA暴露在生理介質中數小時內,會因為凝聚作用形成多孔凝聚層,在4天后會進一步化為孔徑為~100 μmMPH(圖1由于蒽二聚體自帶藍色熒光,作者利用激光共聚焦顯微鏡對其形成過程進行了跟蹤,并通過重建的三維熒光圖像揭示了MPH互相貫穿性大孔結構。此外作者還證實,SA的凝聚行為和所形成MPH的孔隙形貌可以通過調節聚合物濃度、腙鍵密度、主客體對密度和聚合物親水性等參數進行靈活調控。


  然后,作者通過一系列研究揭示了MPC形成的機制:當SA暴露在生理介質中時,外界的水會因為滲透壓差不斷擴散到兩親性的SA網絡中,當超出其親水部分的保水能力后,多余的水從超分子網絡中分離出來,從而誘導形成大孔凝聚層;隨著擴散進去的水不斷滲出,大孔凝聚液泡尺寸不斷增大,而圍繞在液泡周圍動態超分子網絡則會在未包合蒽二聚體的疏水作用驅動下不斷凝聚,形成越來越致密的孔壁;最終,這些致密而堅固的孔壁導致大孔凝聚層向MPC轉變,并限制了液泡的進一步增長,從而保持了所獲得MPH的穩定結構 


1基于γCD/蒽二聚體主客體作用的超分子組裝物通過凝聚作用形成大孔水凝膠的示意圖。


  最后,作者證實了這種源自液體SA的、具有自進化大孔結構的MPH,可以作為一種可注射性大孔支架材料用于干細胞3D培養。有趣的是,隨著SA進化為MPH過程中,封裝在SA中的小鼠胚胎干細胞(mESCs)和人體間充質干細胞(hMSCs)會停留在孔壁處,原位生長成尺寸分別為79.2110.8 μm3D多細胞球體,從而增強其干性保持和軟骨分化能力(圖2)。作為對照,具有同SA相似初始力學性能的無孔靜態水凝膠,則不能支持干細胞的成球化生長和相關功能。這項工作的發現不僅為具有自進化結構的生物材料的設計提供了有價值的指導,而且為3D多細胞球體培養和其他多樣化的生物醫學應用提供了有前景的策略。 


2具有自進化大孔結構的MPH能夠促進干細胞的成球化生長及其相關生物學功能。


  該研究成果以Coacervation-Mediated Cytocompatible Formation of Supramolecular Hydrogels with Self-evolving Macropores for 3D Multicellular Spheroid Culture”為題發表在材料領域頂級期刊《Adv. Mater.》上(DOI: 10.1002/adma.202300636)。安徽大學青年教師楊雪峰博士、香港中文大學楊伯光鄧穎瑞博士及博士生謝憲為共同第一作者,華南理工大學趙鵬超邊黎明教授為共同通訊作者。該研究工作得到了國家重點研發計劃、安徽省自然科學基金和香港特區政府相關基金的資助。


  原文鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/adma.202300636


作者簡介


  邊黎明教授2021年獲聘教育部長江學者特聘教授,入職華南理工大學生物醫學科學與工程學院,現任學院副院長。邊教授長期致力于發展先進納米材料與水凝膠材料在生物醫學領域的應用,并且逐漸建立了從基礎材料學,生物醫學研究到醫療應用研究的多方向的深度研究。邊教授團隊近期在國際高水平學術期刊上發表論文數十篇,相關詳細內容可查閱邊教授實驗室網站:https://www.x-mol.com/groups/bian_lab


  楊雪峰博士為安徽大學生命科學學院高層次引進人才,碩士生導師,主要從事再生醫學用生物材料研究,2006-2013年畢業于合肥工業大學高分子系(導師:丁運生教授),2017年于武漢大學高分子系獲得博士學位(導師:張俐娜院士),2018-2021年于香港中文大學生物醫學工程系從事博士后研究(合作導師:邊黎明教授),近年在Advanced Materials, Advanced Functional Materials, Carbohydrate Polymers等期刊發表論文10余篇。

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(責任編輯:xu)
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