本發明屬于生物醫藥材料技術領域，公開了一種腫瘤靶向絲膠蛋白膠束及其制備方法和應用。本發明方法以生物相容性良好、可生物降解的水溶性天然蛋白絲膠蛋白為原料，室溫條件下合成含有疏水性膽固醇基團的兩親性絲膠蛋白衍生物，進一步通過化學反應偶聯葉酸，制備得到靶向兩親性絲膠蛋白衍生物，其在水溶液中與疏水性藥物IR780通過自組裝可以形成載藥納米膠束。該納米膠束體系能夠有效增加藥物在血液循環中的穩定性以及降低藥物的毒副作用，因而在制備腫瘤診斷制劑或治療藥物中具有很好的研究價值和應用前景。