基于小分子識別誘導的蛋白質超分子組裝及表面固定研究
項目類別：國家自然科學基金面上項目
項目編號：21374057
項目規模：75萬RMB
參與人員：全體研究生
起止日期：2014/01-2017/12
在零污染背景上固定蛋白質具有重要應用意義，但目前采用的化學/物理固定 方法過程復雜，其特異性和靈敏度不能滿足要求。本項目創新性地利用小分子（如 HEPES 和 TCEP）對溶菌酶特異性識別及相轉變的誘導作用，研究建立溶菌酶分子在零污染背景基材表 面的直接固定方法，解決在零污染背景上固定目標蛋白質分子的關鍵核心難題。通過在分子 水平上研究小分子對溶菌酶特異性識別和誘導其相轉變的微觀進程，以及相轉變產物與包括 零污染背景在內的各種表面之間的相互作用，闡明直接固定方法的作用機理。在實現溶菌酶 相轉變產物與零污染背景穩定結合的基礎之上，通過生物素標記或溶菌酶與目標蛋白質偶 聯，研究建立一整套目標生物分子在零污染背景上直接固定的科學方法。該科學方法的建立 擬完全摒棄傳統方法中對零污染背景進行重復活化和鈍化的繁瑣步驟，從而有效解決生物分 子表面固定中的關鍵問題，為從實際復雜體系中高靈敏度鉤釣靶向蛋白質提供科學依據。